高效表达重组人神经生长因子的CHO细胞株及其构建方法

基本信息

申请号 CN201110004328.7 申请日 -
公开(公告)号 CN102586190B 公开(公告)日 2014-01-01
申请公布号 CN102586190B 申请公布日 2014-01-01
分类号 C12N5/10(2006.01)I;C12N15/12(2006.01)I;C12N15/85(2006.01)I;C12P21/02(2006.01)I;C12R1/91(2006.01)N 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 刘荷中;乐伟;史权威;彭璐佳;葛艳华 申请(专利权)人 北京福睿君安科技有限公司
代理机构 北京海虹嘉诚知识产权代理有限公司 代理人 北京华安科创生物技术有限公司
地址 100085 北京市海淀区开拓路5号2层B216
法律状态 -

摘要

摘要 本发明涉及“高效表达重组人神经生长因子的CHO细胞株及其构建方法”,属于生物技术领域。该细胞株的保藏编号为:CGMCC?No.4541,能稳定表达具有生物活性的重组人神经生长因子(rhNGF)。本发明还公开了构建该CHO细胞株的方法,通过细胞转染、基因扩增和对扩增后细胞系进行亚克隆筛选,获得了适合无血清悬浮培养的高效表达单克隆细胞株。本发明同时也公开了该CHO细胞株分泌表达的重组人神经生长因子序列,分泌的重组人神经生长因子具有良好的生物活性,在体外可以维持PC12增殖,诱导PC12细胞分化以及刺激鸡胚背根神经节神经纤维生长,为大规模产业化制备重组人神经生长因子奠定了良好基础。