表达抗体Fab片段的方法
基本信息
申请号 | CN201810355289.7 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN110387394B | 公开(公告)日 | 2022-01-11 |
申请公布号 | CN110387394B | 申请公布日 | 2022-01-11 |
分类号 | C12P21/00(2006.01)I;C12R1/19(2006.01)N | 分类 | 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程; |
发明人 | 冯军;黄宗庆;李乐乐;吴勇;路建光;张庆彬;张友 | 申请(专利权)人 | 上海多米瑞生物技术有限公司 |
代理机构 | 上海一平知识产权代理有限公司 | 代理人 | 胡丹;徐迅 |
地址 | 201203上海市浦东新区中国(上海)自由贸易试验区张衡路1559号1幢2B15 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明公开了一种表达抗体Fab片段的方法。具体方法是将保存的重组基因工程大肠杆菌种子,经过活化,摇瓶培养,扩大转接至5L发酵罐中通气搅拌培养,当发酵罐中菌体OD600达到约40时,补加一定量的MgSO4,并降温至25℃,继续发酵,当菌体OD达到约90时,加入IPTG进行诱导,并流加补料培养基进行补料,发酵进行到70‑90小时后,收集发酵液。本发明通过优化发酵过程中的溶氧DO,诱导剂IPTG终浓度C,补料速度V,加入IPTG后继续发酵的温度T等可以大大提高抗VEGF抗体Fab片段的表达量,最高的表达量可以达到360mg/L,可大大降低抗VEGF抗体Fab片段的生产成本。 |
