一种NK细胞的无血清培养方法
基本信息
| 申请号 | CN201810124169.6 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN108300694B | 公开（公告）日 | 2018-07-20 |
| 申请公布号 | CN108300694B | 申请公布日 | 2018-07-20 |
| 分类号 | C12N5/0783(2010.01)I | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 李杰;刘振云;徐华栋;王维;程丰伟 | 申请（专利权）人 | 苏州一兮生物技术有限公司 |
| 代理机构 | 合肥市浩智运专利代理事务所（普通合伙） | 代理人 | 安徽古一生物科技有限公司;合肥一兮生物科技有限公司 |
| 地址 | 238000安徽省合肥市巢湖市经济开发区管委会南三楼301室 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明涉及生物技术领域，提供了一种NK细胞的无血清培养方法，包括如下步骤：(1)从外周血分离单个核细胞，重悬于无血清培养基中，调整单个核细胞浓度，培养箱中静置培养过夜；(2)第2天，从培养液中吸出悬浮细胞，接种于细胞培养瓶，补加无血清培养基，同时添加抗CD16抗体、IL2和IL3；第4天，补加无血清培养基，添加IL2、IL3，继续培养至第6天；(3)第7天，补加无血清培养基，添加IL15、α‑半乳糖神经酰胺，继续培养至第14天；(4)离心收集NK细胞，使用流式抗体鉴定NK细胞表型。本发明的优点在于：采用无血清培养方法，通过14天的体外培养，获得90％纯度以上、扩增倍数80倍以上的NK细胞。 |
