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一种可提高CRISPR/Cas9系统同源重组效率的方法和应用

基本信息

申请号 CN202110855459.X 申请日 -
公开（公告）号 CN113667017A 公开（公告）日 2021-11-19
申请公布号 CN113667017A 申请公布日 2021-11-19
分类号 C07K19/00（2006.01）I;C12N15/113（2010.01）I;C12N15/63（2006.01）I;C12N15/90（2006.01）I;A01K67/027（2006.01）I 分类 有机化学〔2〕;
发明人 孙瑞林;王津津;周宇 申请（专利权）人 广东南模生物科技有限公司
代理机构 北京纪凯知识产权代理有限公司 代理人 陆惠中;王永伟
地址 201318上海市浦东新区半夏路178号2幢2-4层
法律状态 -

摘要

摘要 本发明提供了一种可提高CRISPR/Cas9系统同源重组效率的方法和应用，包括：Cas9‑TetR融合蛋白、向导RNA、含有四环素操纵子（tetO）元件的载体，以及一种利用上述系统进行同源重组的方法。本方法不需要对重组载体或者Cas9蛋白进行额外的化学修饰、纯化，只需要像常规载体构建一样，将同源重组载体构建到含有tetO元件的骨架载体中即可；可以提高介导DNA大片段（超过2000碱基对）同源重组的阳性率；并且在基因修饰动物模型制备中可以提高2‑3倍的同源重组阳性率。