PLA2R、C1q、THSD7A融合蛋白及其构建方法、应用

基本信息

申请号 CN202011014743.6 申请日 -
公开(公告)号 CN112111015B 公开(公告)日 2021-12-07
申请公布号 CN112111015B 申请公布日 2021-12-07
分类号 C07K19/00(2006.01)I;C12N15/62(2006.01)I;C12N15/85(2006.01)I;C12N5/10(2006.01)I;G01N33/68(2006.01)I 分类 有机化学〔2〕;
发明人 秦枫;蒋洪娇;周志琼;颜松;张小飞;周玥;黄敬双;张伟;万文琴;鲜静;吴斌 申请(专利权)人 四川携光生物技术有限公司
代理机构 成都行之专利代理事务所(普通合伙) 代理人 唐邦英
地址 215000 江苏省苏州市中国(江苏)自由贸易试验区苏州片区苏州工业园区新平街388号21幢7层01单元
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了PLA2R、C1q、THSD7A融合蛋白及其构建方法、应用,构建方法包括以下步骤:S1、依次连接PLA2R、THSD7A、C1q核苷酸序列获得目的基因,C1q重复三次,PLA2R、THSD7A之间加入Linker序列,THSD7A、C1q之间加入Linker序列,相邻C1q之间加入Linker序列;S2、在目的基因前加入真核KOZAK序列,在上游加入限制性核酸内切酶位点BamⅠ,在下游加入NotⅠ酶切位点,C端加入6*His标签序列,根据哺乳细胞偏好设计全序列基因;S3、将步骤S2获得的全序列基因与质粒进行双酶切获得酶切产物;S4、将步骤S3获得的酶切产物通过T4连接酶连接,获得重组质粒;S5、将重组质粒在哺乳细胞中表达获得PLA2R、C1q、THSD7A融合蛋白。通过本发明所述方法构建的融合蛋白能提高检测试剂盒的灵敏度和特异性,减少漏检和错检。