一种L-苏氨酸转醛酶突变体的高通量快速筛选方法专利查询专利号|摘要-满商公司网

一种L-苏氨酸转醛酶突变体的高通量快速筛选方法

基本信息

申请号	CN201911342288.X	申请日	-
公开（公告）号	CN110904188A	公开（公告）日	2020-03-24
申请公布号	CN110904188A	申请公布日	2020-03-24
分类号	C12Q1/48;C12Q1/32	分类	生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程;
发明人	林娟;许炼;王力超;许鑫琦;陈承滔;赖凌燕	申请（专利权）人	福建昌生生物科技发展有限公司
代理机构	福州旭辰知识产权代理事务所（普通合伙）	代理人	福州大学;福建昌生生物科技发展有限公司
地址	350116 福建省福州市闽侯县上街镇大学城学园路2号福州大学新区
法律状态	-

摘要

本发明公开了一种L‑苏氨酸转醛酶突变体的高通量快速筛选方法，属于生物化学和酶工程领域。本发明取乙醛及乙醇脱氢酶反应液，随即置于酶标仪中检测OD340nm随时间的变化情况，计算OD340nm下降的平均反应速率VOD340nm，以乙醛浓度为自变量x，VOD340nm为因变量y，得到回归方程y＝ax，以及乙醛标准曲线。转醛反应液、L‑苏氨酸转醛酶突变体全细胞反应液，充分混匀反应结束后，离心除去细胞沉淀，取上清液和乙醇脱氢酶反应液，随即置于酶标仪中检测OD340nm随时间的变化情况，计算OD340nm下降的平均速率VOD340nm；通过VOD340nm计算得到反应液中乙醛的浓度，以乙醛浓度的高低来筛选L‑苏氨酸转醛酶突变体。本发明不受反应液中的杂质干扰，灵敏度和准确性高，重复性好，操作简便，便于推广应用。