一种用于基因编辑NK细胞的mRNA模板及构建方法、mRNA的体外转录方法和应用
基本信息
| 申请号 | CN202110715607.8 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN113444744A | 公开（公告）日 | 2021-09-28 |
| 申请公布号 | CN113444744A | 申请公布日 | 2021-09-28 |
| 分类号 | C12N15/85（2006.01）I;C12N15/66（2006.01）I;C12N5/10（2006.01）I;C12N5/0783（2010.01）I;C07K14/725（2006.01）I;C07K14/54（2006.01）I | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 焦顺昌;张嵘;宋文静;袁翰 | 申请（专利权）人 | 北京鼎成肽源生物技术有限公司 |
| 代理机构 | 北京高沃律师事务所 | 代理人 | 苏士莹 |
| 地址 | 102200北京市昌平区双营西路86号院4号楼1至5层1单元101 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明提供了一种用于基因编辑NK细胞的mRNA模板及构建方法、mRNA的体外转录方法和应用，涉及生物医药技术领域。本发明在mRNA的模板上采用一种线性化质粒，省略线性化步骤；在模板中预先加入PolyA121结构，舍去额外的加尾工作；采用ARCA抗反帽的帽子类似物，在体外转录过程中同时完成加帽。总之，本发明通过特殊的反应体系和特殊线性化质粒模板，将mRNA的体外转录简化为一步。本发明减少了mRNA的降解，大大降低了对NK细胞的刺激性和毒性；帽子类似物大大提高了mRNA的稳定性，降低了NK细胞炎性反应。本发明利用制备得到的mRNA在NK细胞上可成功过表达细胞因子或人工抗原嵌合受体。 |
