乳牙间充质干细胞的制备方法及配合使用的试剂盒

基本信息

申请号 CN201610476143.9 申请日 -
公开(公告)号 CN105907711A 公开(公告)日 2016-08-31
申请公布号 CN105907711A 申请公布日 2016-08-31
分类号 C12N5/0775(2010.01)I;A01N1/02(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 晁若瑜;庄莎莎;王颖 申请(专利权)人 安徽新生命干细胞科技有限公司
代理机构 - 代理人 -
地址 230088 安徽省合肥市高新区香樟大道168号科技实业园D4栋
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种乳牙间充质干细胞的制备方法:用生理盐水和75%酒精对乳牙组织表面进行清洗、消毒,乳牙保存液中保存;乳牙中取牙髓,加入牙髓消化液消化;获得单细胞悬液;加入细胞培养液,离心清洗,沉淀细胞加入细胞培养液,放入二氧化碳培养箱中培养;原代细胞达70%融合时,加入细胞洗剂液,晃动培养瓶冲洗细胞,吸弃细胞洗剂液,加入细胞消化液消化,加入细胞培养液终止消化,反复吹打瓶底至细胞完全脱落,加入细胞培养液接种到培养瓶中,放入二氧化碳培养箱内培养,为P1代间充质干细胞;P1代融合达70?80%时,胰蛋白酶消化,收集消化细胞,离心,接种;3d后再经胰蛋白酶消化,收集消化细胞,离心,计数,接种,后P3代细胞生长到80%时收获细胞冻存。