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筛选超低岩藻糖细胞系的方法和应用

基本信息

申请号 CN201610194325.7 申请日 -
公开（公告）号 CN106167525B 公开（公告）日 2019-03-19
申请公布号 CN106167525B 申请公布日 2019-03-19
分类号 C07K16/00;C07K16/46;C12N15/85;C12N5/10;A61K39/395 分类 有机化学〔2〕;
发明人 朱晓东;张海涛 申请（专利权）人 北京轩竹康明生物科技有限公司
代理机构 北京超凡志成知识产权代理事务所（普通合伙） 代理人 吴开磊
地址 100176 北京市北京经济技术开发区科创六街88号孵化楼509室
法律状态 -

摘要

摘要 筛选超低岩藻糖细胞系的方法和应用,本发明提供了构建表达抗体和IgG‑Fc融合蛋白岩藻糖缺陷型的宿主细胞方法及抗体和IgG‑Fc融合蛋白岩藻糖活性的检测方法，及此类细胞株的具体应用。本发明通过TALEN（和/或CRISPR）技术高效敲除生产抗体或IgG‑Fc融合蛋白工程细胞中的岩藻糖基转移酶（FUT8）基因的表达来实现，通过小扁豆凝集素（LCA）加压、基因测序、流式细胞仪筛选方法，获得岩藻糖高效敲除的宿主细胞。并将岩藻糖缺陷的CHOK1宿主细胞株构建成表达抗体蛋白的稳定工程细胞株，获得抗体蛋白后进行糖型分析，结果表明岩藻糖敲除效率达99％以上。