NY-ESO-1特异的TCR及其制备方法
基本信息
申请号 | CN201910614365.6 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN110468106A | 公开(公告)日 | 2019-11-19 |
申请公布号 | CN110468106A | 申请公布日 | 2019-11-19 |
分类号 | C12N5/10(2006.01)I; C12N15/85(2006.01)I | 分类 | 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程; |
发明人 | 施炜星; 杨春霞 | 申请(专利权)人 | 上海宇研生物技术有限公司 |
代理机构 | 上海三方专利事务所(普通合伙) | 代理人 | 上海宇研生物技术有限公司; 江苏西迪尔生物技术有限公司 |
地址 | 200333 上海市普陀区中江路879弄4号楼401室 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明涉及NY‑ESO‑1特异的TCR及其制备方法,用人工果蝇抗原提呈细胞负载NY‑ESO‑1抗原肽,激活CD8+T细胞产生CTL细胞,产生的细胞毒性CTL细胞经流式分选仪用HLA‑A*02:01 NY‑ESO‑1 Tetramer‑SLLMWITQC‑APC(MBL,TS‑M011‑2)及CD8‑FITC荧光双染、进行流式检测,筛选收集双阳性的CTL细胞,将分选得到的CTL细胞进行单细胞TCR基因测序,测得TCRα和β可变区基因序列,将TCR基因进行优化及设计,将TCR基因的恒定区改为鼠源,并加上信号肽,得到TCRα和β链的全基因序列,基因合成TCR α和TCR β链,以IRES序列连接TCR α和TCR β链,使TCRα和TCR β链在一个质粒中共同表达,得到TCR基因,将TCR基因进行真核表达。 |
