以CA19-9 cDNA片段为模板制备RNA探针的方法
基本信息
| 申请号 | CN201610083165.9 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN105567845B | 公开（公告）日 | 2020-05-01 |
| 申请公布号 | CN105567845B | 申请公布日 | 2020-05-01 |
| 分类号 | C12Q1/6811;C12Q1/6886;C12N15/11;C12N15/10 | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 徐学明;鲁隼;冯俊清 | 申请（专利权）人 | 广州复能基因有限公司 |
| 代理机构 | 中科专利商标代理有限责任公司 | 代理人 | 张莹 |
| 地址 | 510663 广东省广州市广州科学城国际企业孵化器D区8楼 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明提供了一种以CA19‑9 cDNA为模板制备RNA探针的方法。该方法包括以下步骤：针对CA19‑9 mRNA序列筛选多个靶序列，对于每个靶序列设计至少一对引物，所述引物的PCR扩增产物为多重DNA片段，所述多重DNA片段能包括所有靶序列；从CA19‑9 cDNA质粒中，采用上述引物，通过PCR扩增得到所述多重DNA片段，纯化后混合，作为模板；加入RNA聚合酶和带有生物素标记的UTP进行反应，将UTP掺入产物，纯化后得到RNA探针。本发明得到的cRNA探针能够全部覆盖所有靶序列，简化了探针制备步骤，大幅度缩短整个实验时间，探针特异性更高，稳定性更强，背景信号更低且灵敏度更高。在此基础上，本发明提供了一种快速检测胰腺癌相关的CA19‑9表达的试剂盒。 |
