体外高效扩增NK和转染NKG2D活化NK细胞的方法专利查询专利号|摘要-满商公司网

体外高效扩增NK和转染NKG2D活化NK细胞的方法

基本信息

申请号	CN202110565482.5	申请日	-
公开（公告）号	CN113337464A	公开（公告）日	2021-09-03
申请公布号	CN113337464A	申请公布日	2021-09-03
分类号	C12N5/0783（2010.01）I;C12N5/10（2006.01）I;C12N15/85（2006.01）I;C12N15/65（2006.01）I	分类	生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程;
发明人	徐健;李陶;张扬	申请（专利权）人	浙江圣希澳医学科技有限公司
代理机构	北京盛凡佳华专利代理事务所（普通合伙）	代理人	孙瑞峰
地址	322399浙江省金华市磐安县安文街道环城北路18号
法律状态	-

摘要

本发明属于生物医药领域，细胞治疗技术范畴，具体是体外高效扩增NK和转染NKG2D活化NK细胞的方法。包括具体方法为：NK细胞体外高效扩增技术优化及NK免疫生物学特性检测；应用RT‑PCR方法检测肿瘤细胞及肿瘤组织中NKG2D配体MICA，ULBP 1,2,3的mRNA表达；NKG2D克隆载体的构建；NKG2D真核表达载体的构建；真核表达载体在CHO细胞中的表达及鉴定；真核表达载体转染NK细胞及对NK细胞生物学功能影响。本发明提供一种利用基因工程技术构建pEGFP‑N1/NKG2D真核荧光表达载体，将构建好的pEGFP‑N1/NKG2D质粒转染NK细胞，应用MTT方法检测NKG2D转染前后NK细胞增殖情况和对肿瘤细胞系的杀伤效应，RT‑PCR方法检测相关杀伤分子IL‑2、TNF‑a、Perforin、TWEAK的mRNA表达水平，为肿瘤治疗提供新思路的体外高效扩增NK和转染NKG2D活化NK细胞的方法。