一种热稳定性改良的木聚糖酶xyn-LVK及其基因

基本信息

申请号 CN201510741237.X 申请日 -
公开(公告)号 CN106676086B 公开(公告)日 2019-07-16
申请公布号 CN106676086B 申请公布日 2019-07-16
分类号 C12N9/42;C12N15/56;C12N15/81;C12N1/19;C12N15/11;C12R1/84 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 王剑英;郭宏涛;白孟飞;吴亚宁;谭福建 申请(专利权)人 深圳市爱格丽生态技术有限公司
代理机构 深圳市万商天勤知识产权事务所(普通合伙) 代理人 安徽绿微康生物科技有限公司
地址 247099 安徽省池州市经济技术开发区双龙路1号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种热稳定性改良的木聚糖酶xyn‑LVK,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明通过理性设计,在木聚糖酶xyn‑CDBFV的N端结构域和催化中心之间设计引入7位/217位和11位/45位二硫键,即得到重组木聚糖酶xyn‑LVK,在xyn‑LVK中,N端结构域和催化中心之间有三个二硫键,它们使N端结构域这个“夹子”更稳固的夹住催化中心,使突变酶在高温下更加稳定。将xyn‑LVK在毕赤酵母中表达后,与木聚糖酶xyn‑CDBFV相比,突变后的酶的热稳定性得到了明显的提高,在90℃处理4min还能保留65%的酶活,处理8min后还有42%的剩余酶活性。