一种重组肺炎球菌溶血素制备及纯化的方法

基本信息

申请号 CN202110896837.9 申请日 -
公开(公告)号 CN113480622A 公开(公告)日 2021-10-08
申请公布号 CN113480622A 申请公布日 2021-10-08
分类号 C07K14/315(2006.01)I;C07K1/14(2006.01)I;C07K1/18(2006.01)I;C07K1/20(2006.01)I;C07K1/34(2006.01)I;C07K1/36(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C12N15/31(2006.01)I;C12P21/02(2006.01)I 分类 有机化学〔2〕;
发明人 孙莹莹;吴金军;方红春;赵志强 申请(专利权)人 江苏坤力生物制药有限责任公司
代理机构 上海弼兴律师事务所 代理人 王卫彬;黄益澍
地址 215129江苏省苏州市高新区泰山路599号3号楼1楼
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种重组肺炎球菌溶血素的纯化方法,其包括以下步骤:(1)粗纯化:将精氨酸与表达所述重组肺炎球菌溶血素的菌体混合,获得粗产物;在粗纯化的体系中,所述精氨酸的终浓度为0.5~0.75M,所述菌体的终浓度为0.2~0.5g/mL;(2)精纯化:将所述粗产物经弱阴离子交换层析、疏水层析和强阴离子交换层析后,获得所述重组肺炎球菌溶血素。该方法操作便捷,过程稳定可控、目的蛋白表达量高,纯化后的目的蛋白回收率高、纯度分析仅为目标蛋白单一条带,且其各项指标均符合《中国药典》(2015版)对重组蛋白的要求,利于大规模生产。