一种腺病毒载体及其构建方法

基本信息

申请号 CN201810565182.5 申请日 -
公开(公告)号 CN108841866B 公开(公告)日 2022-07-05
申请公布号 CN108841866B 申请公布日 2022-07-05
分类号 C12N15/861(2006.01)I;C12N15/66(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 蓝田;罗燕;施金秀;王焕荣 申请(专利权)人 云舟生物科技(广州)股份有限公司
代理机构 广州嘉权专利商标事务所有限公司 代理人 -
地址 510663 广东省广州市高新技术产业开发区科学城掬泉路3号广州国际企业孵化器(D区)D301-D309号房
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了提供了一种重组腺病毒载体及其构建方法。该方法为将pRed/ET(Δα)电转到含有pAV.Des1d载体的DB3.1感受态中,用一个包含同源臂的Kan抗性片段进行同源重组,通过连续抗性压力下筛选出只具有Amp+Kan抗性,而没有Amp+Cm抗性的阳性克隆。第二步重组用带同源臂的attR4‑Cm‑ccdB‑attR2或attR4‑Cm‑ccdB‑attR3进行重组,再利用抗性筛选出只具有Amp+Cm抗性,而没有Amp+Kan抗性的正确的阳性克隆,从而得到本发明腺病毒载体。本发明腺病毒表达载体,且具有很好的准确性、高效性,成功率高。大大降低了人力时间成本,提高了用户体验。