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一种大量获得间充质干细胞细胞生长因子的方法

基本信息

申请号	CN202010915025.X	申请日	-
公开（公告）号	CN112029714A	公开（公告）日	2020-12-04
申请公布号	CN112029714A	申请公布日	2020-12-04
分类号	C12N5/0775;C07K1/34;C07K1/14	分类	生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程;
发明人	郭巧;张旭;王熙凯	申请（专利权）人	中康再生医学科技（海南）有限公司
代理机构	-	代理人	-
地址	570000 海南省海口市秀英区南海大道226号海口国家高新区创业孵化中心A楼5层A9-5室
法律状态	-

摘要

本发明公开了一种大量获得间充质干细胞细胞生长因子的方法，包括以下步骤：(1)间充质干细胞的分离：通过组织贴壁或酶消化法提取间充质干细胞；(2)低氧条件扩增培养：将间充质干细胞置于低氧环境下进行培养；(3)用0.25％胰酶‑EDTA溶液消化、用0.9％生理盐水清洗沉淀，然后用0.9％生理盐水调整细胞浓度，然后再加入1.5‑2.5mg/mL的EDTA和6‑9mg/mL的Vc，混匀离心；(4)联合超滤浓缩：用0.22μm滤膜过滤，然后通过50KD超滤膜，收集透析液，再将透析液通过1KD滤膜，收集截留液，得到细胞因子浓缩液。本发明低氧环境诱导培养即可提高间充质干细胞因子的含量，同时通过联合超膜过滤可有效去除间充质干细胞培养液中的杂质，从而得到的细胞因子纯度高，产量大。