一种慢病毒载体及其病毒颗粒的制备和应用

基本信息

申请号 CN201310062193.9 申请日 -
公开(公告)号 CN103290056A 公开(公告)日 2013-09-11
申请公布号 CN103290056A 申请公布日 2013-09-11
分类号 C12N15/867(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 叶军;陈海旭 申请(专利权)人 上海诺百生物科技有限公司
代理机构 上海智信专利代理有限公司 代理人 胡美强;沈利
地址 200233 上海市徐汇区桂平路333号5号楼301室
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种慢病毒载体及其病毒颗粒的制备和应用。其以慢病毒载体pLenti6.3/V5-DEST为骨架,将BamHI和XhoI酶切位点之间的片段替换为多克隆位点片段,并且按转录方向在该多克隆位点片段的3’端插入IRES-GFP片段,所述的多克隆位点依次为:BamHI,PacI,NheI,AscI,SwaI,PmeI,所述IRES-GFP片段是以pIRES2-EGFP载体为模板,由上游引物和下游引物经过PCR扩增而制得的,其中上下游引物的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.4、5所示。本发明使用价格低廉的化学试剂即可完成,并且制得病毒颗粒滴度高、活性好,在侵染目的细胞中达到很好的效果。