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一种脐带间充质干细胞的分离方法

基本信息

申请号	CN201911379261.8	申请日	-
公开（公告）号	CN110964693A	公开（公告）日	2020-04-07
申请公布号	CN110964693A	申请公布日	2020-04-07
分类号	C12N5/0775	分类	生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程;
发明人	任玲;赵俊伟;殷克然;周兴旺;蔡子梦;宋健	申请（专利权）人	河北银丰鼎诚生物技术有限公司
代理机构	山东舜天律师事务所	代理人	李新海
地址	050000 河北省石家庄市高新区太行南大街197号A座201室
法律状态	-

摘要

本发明公开了一种脐带间充质干细胞的分离方法：(1)取新鲜脐带，用PBS缓冲液冲洗干净，剪成小段，剥离组织，放于组织消化液中，将小段剪成组织块，加入氯化钙溶液，37℃消化45分钟，每隔15分钟取出吹打，混匀；(2)将含组织块的消化产物过筛进行过滤：过滤前先用无血清培养基浸湿网筛，过滤时将含组织块的消化产物逐渐滴加过滤，过滤后用无血清培养基冲洗网筛，得到比较充分的组织块和单细胞悬液；(3)将组织块和单细胞悬液离心，培养，得脐带间充质干细胞。第3天已经有很多细胞，7～8天，生长迅速，细胞处于对数生长期，细胞融合度能达到95～100％。后期进行成肌/成脂诱导分化，原代细胞分化程度很高，且细胞状态良好。