一种用于甲基化扩增子测序的建库方法

基本信息

申请号 CN202010835374.0 申请日 -
公开(公告)号 CN112126987A 公开(公告)日 2020-12-25
申请公布号 CN112126987A 申请公布日 2020-12-25
分类号 C40B50/06(2006.01)I;C12Q1/6858(2018.01)I 分类 组合技术〔8〕;
发明人 王俊;李小花;刘朝煜;姚旭梅 申请(专利权)人 深圳思凝一云科技有限公司
代理机构 北京中南长风知识产权代理事务所(普通合伙) 代理人 郑海
地址 518101广东省深圳市宝安区新安街道兴东社区留仙大道2号汇聚创新园2栋2605
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种用于甲基化扩增子测序的建库方法,涉及分子生物学技术领域,所述建库方法包括以下步骤:1)第一次PCR扩增;2)一次磁珠纯化;3)补平修复;4)接头连接;5)二次磁珠纯化;6)第二次PCR扩增;7)三次磁珠纯化。为了解决传统靶向甲基化测序中的测序文库的构建费用过高和周期过长的问题,本发明通过利用特异性引物对重亚硫酸盐转化过后的DNA进行多重PCR反应得到靶向的扩增子,然后利用连接反应将NGS测序用到的接头加至扩增子两端纯化回收形成测序文库,有利于实现靶向甲基化测序,减低了测序文库的构建费用和周期,具有广阔的市场前景。