一种构建T载体的方法

基本信息

申请号 CN201010281650.X 申请日 -
公开(公告)号 CN101948862B 公开(公告)日 2012-11-21
申请公布号 CN101948862B 申请公布日 2012-11-21
分类号 C12N15/66(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 李艳萍 申请(专利权)人 中生方政(天津)生物技术有限公司
代理机构 北京集佳知识产权代理有限公司 代理人 逯长明
地址 300457 天津市开发区第四大街80号天大科技园B5
法律状态 -

摘要

摘要 本发明涉及基因工程技术领域,公开了一种构建T载体的方法。该方法以pGEM-T?Easy?Vector、pBS-T?Vector、pSURE-T?Vector为出发载体与Xcm?I盒连接得到前T载体,然后用Xcm?I限制性内切酶酶切前T载体,回收线性化载体,得到T载体,所述Xcm?I盒序列包括间隔DNA序列和紧密连接于所述间隔DNA序列两侧的各一个附加序列,所述附加序列包括Xcm?I酶切位点序列和Xcm?I酶切位点序列5′端的3个保护碱基。本发明所述构建T载体的方法简单高效,所获得的T载体质量稳定,自身环化率低,克隆效果高,并且可以避免3n+2个核苷酸的cDNA序列在基因表达时发生移码。