用于表达限制性内切酶FspI的甲基化保护菌株的筛选方法
基本信息
| 申请号 | CN201710765015.0 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN107760697A | 公开（公告）日 | 2018-03-06 |
| 申请公布号 | CN107760697A | 申请公布日 | 2018-03-06 |
| 分类号 | C12N15/54;C12N15/74;C12N15/66 | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 张坤晓;韩挺翰;龚雪梅;许恒皓 | 申请（专利权）人 | 江苏愚公生命科技有限公司 |
| 代理机构 | 连云港润知专利代理事务所 | 代理人 | 江苏愚公生命科技有限公司 |
| 地址 | 222000 江苏省连云港市海州区花果山大道17-1-1005至1006 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 一种用于表达限制性内切酶FspI的甲基化保护菌株的筛选方法，通过甲基转移酶M.HhaI基因的获取，构建甲基转移酶M.HhaI的重组表达菌株，甲基化保护菌株的筛选，限制性内切酶FspI基因的获取，构建限制性内切酶FspI的重组表达菌株；再限制酶FspI的重组表达，获得限制酶FspI的重组表达菌株。本发明方法实现了限制酶FspI的高效重组表达；利用乳糖操纵子表达系统进行限制酶FspI的重组表达；抵抗限制酶FspI对宿主基因组DNA的酶切，相对无甲基化保护的表达系统，可稳定且高效进行限制酶FspI的重组表达；筛选出的M.HhaI甲基化保护菌株同样可应用于其他具有类似识别位点的限制酶的重组表达。 |
