通过MDA-PCR富集基因组重排免疫球蛋白基因及生产抗体的方法

基本信息

申请号 CN201110064821.8 申请日 -
公开(公告)号 CN102676532A 公开(公告)日 2012-09-19
申请公布号 CN102676532A 申请公布日 2012-09-19
分类号 C12N15/13(2006.01)I;C12N15/10(2006.01)I;C12N15/79(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 蔡槱伯 申请(专利权)人 成都贝瑞和康医学检验所有限公司
代理机构 北京康信知识产权代理有限责任公司 代理人 北京贝瑞和康生物技术有限公司
地址 102206 北京市昌平区生命园路B-246室
法律状态 -

摘要

摘要 本发明提供了一种特异地扩增基因组的重排免疫球蛋白基因的方法,包括:裂解成熟的B细胞;用多重置换扩增的方法,通过能够特异地扩增抗体重链和/或轻链的可变区的引物扩增所述B细胞的基因组基因,从而相对特异地从基因组扩增包含重链和/或轻链的可变区的序列;以所述多重置换扩增所得的反应液为底物,用特异地结合所述抗体重链和/或轻链的可变区的引物进行PCR扩增,以获得所述抗体重链或轻链的可变区的基因序列;对所得到的PCR产物测序,以确定PCR扩增得到所述抗体重链或轻链的可变区的基因序列。通过本发明的方法获取重排的免疫球蛋白基因并利用该基因生产抗体。