用于PCR扩增的微量丝状真菌高纯度DNA简易制备方法
基本信息
| 申请号 | CN202110902289.6 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN114058509A | 公开（公告）日 | 2022-02-18 |
| 申请公布号 | CN114058509A | 申请公布日 | 2022-02-18 |
| 分类号 | C12N1/06（2006.01）I;C12N15/10（2006.01）I;C12Q1/6806（2018.01）I | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 刘洋;王庭璋;钟啸萍;王焕英;毛鹏阳 | 申请（专利权）人 | 浙江天科高新技术发展有限公司 |
| 代理机构 | 杭州求是专利事务所有限公司 | 代理人 | 林松海 |
| 地址 | 310012浙江省杭州市黄姑山路9号 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明公开了一种用于PCR扩增的微量丝状真菌高纯度DNA简易制备方法，包括以下几个步骤：步骤一，在微型离心管中，加入0.3～0.5 mm无菌石英砂至管总体积的1/20，挑取1～3 mm2真菌菌体菌丝样本于离心管中，加入几丁质酶溶液，捣碎，37℃孵育30分钟；步骤二，加入细胞裂解液，95℃振荡10分钟，离心收集含有核酸的上清液；步骤三，加入磁珠，对核酸‑磁珠复合物进行纯化和洗脱，获得高纯度的DNA。本发明克服了提取试剂盒对样本量的要求，解决了丝状真菌破壁困难，DNA提取中PCR抑制因子存在导致的PCR假阴性等技术问题，实现了微量丝状真菌DNA的快速高质量低成本制备。 |
