一种提高酪氨酸酚裂解酶催化生产左旋多巴效率的方法
基本信息
| 申请号 | CN201810907732.7 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN110055291A | 公开（公告）日 | 2019-07-26 |
| 申请公布号 | CN110055291A | 申请公布日 | 2019-07-26 |
| 分类号 | C12P13/22（2006.01）I; C12N9/88（2006.01）I | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 储消和; 吴黎诚; 生英涛; 陈万河; 程跃; 徐顺清; 沈建; 方明山; 余炜; 柳鹏福; 孙俊杰 | 申请（专利权）人 | 浙江绿创生物科技有限公司 |
| 代理机构 | 杭州赛科专利代理事务所（普通合伙） | 代理人 | 尹建民 |
| 地址 | 310014 浙江省杭州市下城区潮王路18号 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明涉及一种提高酪氨酸酚裂解酶催化生产左旋多巴效率的方法，其特征在于：(1)挑单菌落接种到含LB培养基的试管中，加卡那霉素(50mg/L)30‑37℃，220rpm，培养12‑16h，得到一级种子；(2)将所述一级种子接种到含发酵培养基的摇瓶中培养10‑12h；(3)离心收菌，得到菌体，超声破胞，高速离心，获得上清酶液；(4)酶液加入底物溶液，搅匀，25℃，密封震荡反应；所述底物溶液包括14‑16g/L的丙酮酸钠、10‑12g/L的邻苯二酚、50‑60g/L的醋酸铵、2‑5g/L的亚硫酸钠、1‑3g/L的EDTA，调pH7.5‑8.5，反应产物浓度达到20g/L以上，加入10‑30g/L的左旋多巴晶体，诱导产品提前析晶。本发明大大提高了转化率和产物浓度，提高了产品品质，工艺简单，成本低廉，产率高，具有工业化生产的应用价值。 |
