使用细胞内同步表达法在T4噬菌体表面展示外源蛋白大分子的方法
基本信息
申请号 | CN201310033512.3 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN103074359A | 公开(公告)日 | 2013-05-01 |
申请公布号 | CN103074359A | 申请公布日 | 2013-05-01 |
分类号 | C12N15/70(2006.01)I;C12N7/01(2006.01)I;C12R1/92(2006.01)N | 分类 | 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程; |
发明人 | 高嵩;陶攀;许恒皓;刘伟;尹欣;程斌 | 申请(专利权)人 | 连云港脂立方生物医药研究所有限公司 |
代理机构 | 南京众联专利代理有限公司 | 代理人 | 连云港脂立方生物医药研究所有限公司;江苏愚公生命科技有限公司 |
地址 | 222000 江苏省连云港市海州区花果山大道17-1-1005至1006 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明是一种使用细胞内同步表达法在T4噬菌体表面展示外源蛋白大分子的方法,其步骤如下:带有T4噬菌体天然调控区的Hoc蛋白或Soc蛋白与外源蛋白融合的重组蛋白的表达质粒的构建;将外源重组蛋白的表达质粒转化进入大肠杆菌细胞内:以Hoc蛋白和Soc蛋白缺失的T4噬菌体病毒株感染含有外源重组蛋白表达质粒的大肠杆菌细胞;分离从以上的感染步骤中产生的展示有外源重组蛋白的T4噬菌体颗粒;检测所获得的T4噬菌体颗粒的衣壳上所展示的外源重组蛋白。本发明方法无需进行外源重组蛋白的过表达,避免了体外展示法中需要外源重组蛋白大量过表达的技术瓶颈;无需进行外源重组蛋白的分离纯化,避免了耗时且昂贵的蛋白分离纯化过程。 |
