利用Transwell测量多种细胞对包埋有内皮细胞的细胞基质侵袭性的方法

基本信息

申请号 CN201310284063.X 申请日 -
公开(公告)号 CN103320494A 公开(公告)日 2013-09-25
申请公布号 CN103320494A 申请公布日 2013-09-25
分类号 C12Q1/06(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 刘伟;尹欣;许恒皓;卢辰;高嵩 申请(专利权)人 连云港脂立方生物医药研究所有限公司
代理机构 南京众联专利代理有限公司 代理人 毕东峰
地址 222000 江苏省连云港市新浦区通灌南路108号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明是一种利用Transwell测量多种细胞对包埋有内皮细胞的细胞基质侵袭性的方法,在将内皮细胞与细胞基质充分混合后被转移并完全覆盖Transwell嵌套聚碳酸酯膜的下表面;Transwell嵌套固化后被翻转过来并置于预热的多孔细胞培养板无血清细胞培养液中,并在嵌套上方加入事先经荧光标记的待测细胞悬浮液;侵袭后移除嵌套上方未侵袭的细胞,用适当的酶消化细胞基质至液态,通过离心收集其中的细胞。然后用小量PBS悬浮收集到的细胞,并将其中的一部分放入Terasaki板中,置于荧光显微镜下进行图片采集以及后续分析。本发明首次实现了将两种不同类型的细胞放置于接近生理三维结构的模型中,并能够定量测量其中一种细胞相对于另一种细胞的侵袭能力。