一种二代高通量测序的不对称DNA双链接头及其应用专利查询专利号|摘要-满商公司网

一种二代高通量测序的不对称DNA双链接头及其应用

基本信息

申请号	CN201010544306.5	申请日	-
公开（公告）号	CN102061335B	公开（公告）日	2014-07-23
申请公布号	CN102061335B	申请公布日	2014-07-23
分类号	C12Q1/68(2006.01)I	分类	生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程;
发明人	李轩;郝沛;潘小宝;黄凯	申请（专利权）人	上海因可科技有限公司
代理机构	南京众联专利代理有限公司	代理人	赵枫
地址	215125 江苏省苏州市工业园区星湖街218号生物纳米园A2楼426单元
法律状态	-

摘要

一种二代高通量测序的不对称DNA双链接头，由两个DNA寡核苷酸单链组成，其制备方法如下：将所述两个DNA寡核苷酸单链溶于淬火溶液中，调整最终浓度达到2mM，体积20微升，然后利用下述条件进行淬火反应，形成局部互补的DNA双链接头：95℃5min；95℃降到12℃，每秒0.1℃；保持在12℃，将退火后的接头溶液1∶4稀释到500μM，并在-20℃保存。其应用采用如下流程：A、不对称DNA接头与DNA样本的连接反应：B、电泳割胶纯化分离未连接的DNA双链接头：C、判断D、基于不对称序列的PCR放大反应：本发明的显著优势：1)建库起始DNA样品用量低至50纳克、灵敏度提高达100倍2)建库的接头连接过程可产生100％的有效测序样本等。