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构建DNA文库的试剂盒及方法

基本信息

申请号	CN202011630766.X	申请日	-
公开（公告）号	CN112708939A	公开（公告）日	2021-04-27
申请公布号	CN112708939A	申请公布日	2021-04-27
分类号	C40B50/06;C40B40/06	分类	组合技术〔8〕;
发明人	许明炎;张晓妮;李慧	申请（专利权）人	深圳海普洛斯医学检验实验室
代理机构	深圳舍穆专利代理事务所（特殊普通合伙）	代理人	黄贤炬
地址	518055 广东省深圳市南山区西丽街道松坪山路1号源兴科技大厦南座1106
法律状态	-

摘要

本公开提供了一种构建DNA文库的试剂盒及方法，其中试剂盒包括混合酶液、混合缓冲液、连接酶和连接缓冲液，混合酶液包含核酸内切酶、T4DNA聚合酶、Klenow片段、TaqDNA聚合酶和T4多聚核苷酸激酶，混合缓冲液和连接缓冲液包含DTT和PEG8000，混合酶液和混合缓冲液用于形成第一反应体系，连接酶和连接缓冲液用于形成第二反应体系，在第一反应体系中，核酸内切酶的工作浓度为0.01至0.05U/μL，T4DNA聚合酶的工作浓度为0.04至0.1U/μL，Klenow片段的工作浓度为0.005至0.02U/μL，TaqDNA聚合酶的工作浓度为0.025至0.075U/μL，T4多聚核苷酸激酶的工作浓度为0.1至0.5U/μL，DTT的工作浓度为5至10mM，PEG8000的工作浓度为1至10％。根据本公开，能够提供一种提高建库效率的构建DNA文库的试剂盒及方法。