一种扩增子测序添加唯一性标识符的方法及应用
基本信息
| 申请号 | CN202111646690.4 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN114277114A | 公开（公告）日 | 2022-04-05 |
| 申请公布号 | CN114277114A | 申请公布日 | 2022-04-05 |
| 分类号 | C12Q1/6869（2018.01）I;C12N15/11（2006.01）I;C40B50/06（2006.01）I;C12Q1/6806（2018.01）I;C12Q1/6858（2018.01）I;C12Q1/6886（2018.01）I | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 许明炎;张晓妮;周书雄 | 申请（专利权）人 | 深圳海普洛斯医学检验实验室 |
| 代理机构 | 深圳鼎合诚知识产权代理有限公司 | 代理人 | 李小焦;彭家恩 |
| 地址 | 518000广东省深圳市南山区西丽街道松坪山路1号源兴科技大厦南座1106 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本申请公开了一种扩增子测序添加唯一性标识符的方法及应用。本申请方法包括，用第一引物对模板核酸进行一次延伸；第一引物包括平台上游引物结合区、UMI和靶标上游引物序列，且平台上游引物结合区和靶标上游引物序列的T替换为dU；然后，向反应体系加入第二引物进行一次延伸；第二引物包括平台下游引物结合区和靶标下游引物序列；然后，向反应体系加入UDG/UNG酶消化dU；消化后，向反应体系加入第三引物进行PCR；第三引物为第一引物平台上游引物结合区序列。本申请方法，通过对引物进行特殊设计，依序向反应体系中加入三种引物，实现使每个原始模板核酸只对应一个UMI，校正每个靶点扩增性偏差，实现靶标基因拷贝数定量检测。 |
