一种可用于人原代细胞基因编辑的Cas9蛋白的制备方法
基本信息
申请号 | CN201910745370.0 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN112391367A | 公开(公告)日 | 2021-02-23 |
申请公布号 | CN112391367A | 申请公布日 | 2021-02-23 |
分类号 | C12N9/22(2006.01)I;C07K19/00(2006.01)I | 分类 | 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程; |
发明人 | 龙飞;张亚莉;岳江嫚;弓蒙蒙;胡金芳;张丽琴 | 申请(专利权)人 | 西安宇繁生物科技有限责任公司 |
代理机构 | 北京领科知识产权代理事务所(特殊普通合伙) | 代理人 | 张丹 |
地址 | 710077陕西省西安市高新区环普科技园天谷八路528号D座西区402 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明公开了一种可用于人原代细胞基因编辑的Cas9蛋白的制备方法,尤其是涉及一种阴离子交换层析法纯化Cas9蛋白的方法,使用所述方法纯化得到的Cas9蛋白经体外切割试验证明具有体外活性,可特异切割DNA序列;同时经过改造的Cas9蛋白N端和C端带有核定位序列,经电转化进入人原代细胞后可对特定基因进行敲除,证明纯化的Cas9蛋白具有体内活性。 |
