一种可用于人原代细胞基因编辑的Cas9蛋白的制备方法

基本信息

申请号 CN201910745370.0 申请日 -
公开(公告)号 CN112391367A 公开(公告)日 2021-02-23
申请公布号 CN112391367A 申请公布日 2021-02-23
分类号 C12N9/22(2006.01)I;C07K19/00(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 龙飞;张亚莉;岳江嫚;弓蒙蒙;胡金芳;张丽琴 申请(专利权)人 西安宇繁生物科技有限责任公司
代理机构 北京领科知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 代理人 张丹
地址 710077陕西省西安市高新区环普科技园天谷八路528号D座西区402
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种可用于人原代细胞基因编辑的Cas9蛋白的制备方法,尤其是涉及一种阴离子交换层析法纯化Cas9蛋白的方法,使用所述方法纯化得到的Cas9蛋白经体外切割试验证明具有体外活性,可特异切割DNA序列;同时经过改造的Cas9蛋白N端和C端带有核定位序列,经电转化进入人原代细胞后可对特定基因进行敲除,证明纯化的Cas9蛋白具有体内活性。