一种工程菌株的构建方法

基本信息

申请号 CN201811588976.X 申请日 -
公开(公告)号 CN109652353A 公开(公告)日 2019-04-19
申请公布号 CN109652353A 申请公布日 2019-04-19
分类号 C12N1/21(2006.01)I; C12N15/29(2006.01)I; C12N15/74(2006.01)I; C12N15/66(2006.01)I; C12N15/65(2006.01)I; C12R1/01(2006.01)N 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 米铁柱; 张国栋; 刘佳音; 邹丹丹; 徐春莹; 修旺珊; 孙艳君 申请(专利权)人 青岛袁策集团有限公司
代理机构 北京华仁联合知识产权代理有限公司 代理人 青岛袁策集团有限公司
地址 266000 山东省青岛市李沧区金水路171号青岛国际院士港16号楼
法律状态 -

摘要

摘要 本申请公开了一种工程菌株的构建方法,包括以下步骤:A、用提取待转化植物的DNA;B、分别获得DsRed基因、EAT1基因、ZmAA基因三种连锁基因表达盒;C、去除Hpt基因的pCAMBIA1300质粒的获取;D、各个表达盒的连接;E、融合片段与pCAMBIA1300‑hpt‑质粒的连接。F、导入到农杆菌中,形成能够用于介导转化植物细胞的工程菌农杆菌。本发明工程菌株的构建方法,构建了双T‑DNA载体,其中一个T‑DNA区含有上述的三连锁基因,另一个T‑DNA区含有潮霉素或者卡那霉素等抗性基因,用于愈伤转化及植株再生阶段的筛选。