BstDNA聚合酶重组突变体、其编码DNA及超快磁珠LAMP检测方法

基本信息

申请号 CN202111146868.9 申请日 -
公开(公告)号 CN113583996B 公开(公告)日 2022-01-14
申请公布号 CN113583996B 申请公布日 2022-01-14
分类号 C12N9/12(2006.01)I;C12N9/96(2006.01)I;C12N15/54(2006.01)I;C12N15/11(2006.01)I;C12Q1/6844(2018.01)I;C07K14/00(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 马海玲;江翱;陈晶晶;柴常升;侯策;曹振;孙晓亮;宋东亮 申请(专利权)人 翌圣生物科技(上海)股份有限公司
代理机构 苏州根号专利代理事务所(普通合伙) 代理人 朱华庆
地址 200120上海市浦东新区天雄路166弄1号楼402室
法律状态 -

摘要

摘要 本发明在野生型Bst DNA聚合酶序列上进行了四个点位的突变,然后将进行点突变后的Bst DNA聚合酶的292‑305的氨基酸替换成DPLPDLIHPRTLRL,在突变后Bst DNA聚合酶序列的C端融合了一个DNA结合蛋白,N端融合了一个HP47多肽序列,在HP47多肽序列前面融合了一个CL7‑SUMO‑Tag,得到Bst DNA聚合酶重组突变体Super‑Bst。Super‑Bst在热稳定性、特异性、链置换能力、延伸能力和逆转录酶活性上得到了显著地提升,能够耐受高盐和各类抑制剂,且可以通过原核表达和亲和纯化大量获得。本发明还公开了其编码DNA,以及一种超快磁珠LAMP检测方法。