重组T4连接酶突变体、编码DNA及NGS建库方法专利查询专利号|摘要-满商公司网

重组T4连接酶突变体、编码DNA及NGS建库方法

基本信息

申请号	CN202111336097.X	申请日	-
公开（公告）号	CN113774032B	公开（公告）日	2022-03-01
申请公布号	CN113774032B	申请公布日	2022-03-01
分类号	C12N9/00（2006.01）I;C12N15/52（2006.01）I;C12Q1/6806（2018.01）I;C40B50/06（2006.01）I	分类	生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程;
发明人	宋东亮;陈晶晶;江翱;孙睿;侯策;王嫚;刘倩;曹振	申请（专利权）人	翌圣生物科技（上海）股份有限公司
代理机构	苏州根号专利代理事务所（普通合伙）	代理人	朱华庆
地址	200120上海市浦东新区天雄路166弄1号楼402室
法律状态	-

摘要

本发明在野生型T4DL的基础上，进行了Q19K、L63T、E88R、P127K、K159S、K225A、F233A、A237R、D371W、E440K、T451K、D452P多个点突变；在突变体的两端包含两个双链DNA结合域；双链DNA结合域与T4DL之间的连接使用多肽桥。最终获得了一系列低偏好性和高效率的重组DNA连接酶突变体T4DLm。并公开了其编码DNA和NGS建库方法。T4DLm在平末端连接上具有显著的优势，连接效率高达95%，且偏好性极低。利用T4DLm开发了高效简便的新型NGS建库技术，具有耗时短、文库产量更高、均一性更好、文库自连更低、捕获测序数据覆盖深度更好等明显的优势，非常适用于临床样本的NGS检测，尤其是肿瘤样本的检测。