一种检测多个样品时测序文库的构建方法及其应用

基本信息

申请号 CN201910056472.1 申请日 -
公开(公告)号 CN109797437A 公开(公告)日 2019-05-24
申请公布号 CN109797437A 申请公布日 2019-05-24
分类号 C40B50/06(2006.01)I; C12Q1/6806(2018.01)I 分类 组合技术〔8〕;
发明人 周骋 申请(专利权)人 北京爱普益生物科技有限公司
代理机构 北京知呱呱知识产权代理有限公司 代理人 北京爱普益生物科技有限公司
地址 100176 北京市大兴区经济技术开发区地盛东路1号爱普益大厦5层
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种检测多个样品时测序文库的构建方法及其应用,该构建方法包括:步骤一、根据基因组DNA序列分别设计上游引物和下游引物;步骤二、在每条上游引物上添加A接头和第一标签,得到上游融合引物,在每条下游引物上添加P接头和第二标签,得到下游融合引物,并将上游融合引物与下游融合引物混合得到混合融合引物;步骤三、将混合融合引物、基因组DNA、含有Mg2+,dNTPs,Taq酶的Tris‑HCl缓冲液和无核酸酶水配制成多重PCR反应体系;步骤四、将得到的多重PCR反应体系进行PCR反应、纯化得到多样品测序文库;本发明构建方法通过上下游引物上不同标签组合识别样品,能够大大降低引物合成量,此外,还能够减少扩增次数,有效降低样品间的数据不均衡。