一种人源化胶原蛋白制备工艺和方法
基本信息
| 申请号 | CN202110252835.6 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN113151342A | 公开（公告）日 | 2021-07-23 |
| 申请公布号 | CN113151342A | 申请公布日 | 2021-07-23 |
| 分类号 | C12N15/81（2006.01）I;C12N15/66（2006.01）I;C12N15/12（2006.01）I;C07K14/78（2006.01）I;C07K1/34（2006.01）I;C07K1/18（2006.01）I;C07K1/36（2006.01）I;C12R1/84（2006.01）N | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 尹鸿萍;刘永军;乐龙;张健;贡艳;冯瑞茹;胡绍显;邵青青 | 申请（专利权）人 | 江苏艾洛特医药研究院有限公司 |
| 代理机构 | - | 代理人 | - |
| 地址 | 211500江苏省南京市江北新区中山科技园博富路9号15幢第二层 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明涉及生物工程技术领域，具体为一种人源化胶原蛋白制备工艺和方法，包括以下步骤；（1）制备质粒：优选人源蛋白中的II型和III型胶原蛋白基因螺旋区的DNA片段，利用PCR技术将DNA片段进行密码子优化和拼接重组，利用引物上加入的NcoI和Xho I的酶切位点，加入相应的限制性内切酶将基因片段切成粘性末端，并与相应酶切处理过的pET32a的表达载体共孵育，（2）转化：将步骤（1）制备的质粒与毕赤酵母进行混合进行转化，获得转化后菌落；（3）多拷贝插入重组子的筛选：将步骤（2）转化后的菌落进行进一步培养，筛选转化子；（4）发酵：将步骤（3）筛选的转化子接种后进行发酵培养获得发酵液；（5）纯化：将步骤（4）得到的发酵液依次进行固液分离、过滤、浓缩和离子交换层析得到产品。 |
