一种基于组蛋白甲基化水平的修饰提高牛克隆效率的载体、细胞及方法
基本信息
| 申请号 | CN201511025413.6 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN105524940B | 公开（公告）日 | 2019-04-05 |
| 申请公布号 | CN105524940B | 申请公布日 | 2019-04-05 |
| 分类号 | C12N15/85（2006.01）I; C12N5/10（2006.01）I; C12N15/873（2010.01）I | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 张涌; 刘鑫; 苏建民; 高明清; 王勇胜; 孙洪政 | 申请（专利权）人 | 杨凌科元克隆股份有限公司 |
| 代理机构 | 北京慕达星云知识产权代理事务所（特殊普通合伙） | 代理人 | 崔自京 |
| 地址 | 712100 陕西省西安市杨凌示范区邰城路3号 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明公开了一种基于组蛋白甲基化水平的修饰提高牛克隆效率的载体、细胞及方法。本发明提供的载体包括阻遏物表达载体和含有阻遏操纵子的表达载体，在转染时将两者共转染到供体细胞中；所述的含有阻遏操纵子的表达载体中插入有牛KDM4B或牛KDM4C基因。将阳性转染的细胞作为供体细胞，再将其注入到去核后的卵母细胞并进行电融合，挑选成功融合的牛体细胞克隆胚培养至36h时，诱导表达牛KDM4B和KDM4C。本发明可以有效减弱体细胞克隆胚在合子激活时期的组蛋白H3K9me3表观遗传修饰水平，从而显著提高后期牛体细胞克隆囊胚的发育率和质量，可高效体外生产牛体细胞克隆胚胎，胚胎移植后克隆牛的出生率也显著提高。 |
