一种基于TALEN 介导的Sp110 巨噬细胞特异打靶载体及重组细胞
基本信息
| 申请号 | CN201410528091.6 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN104293833A | 公开（公告）日 | 2015-01-21 |
| 申请公布号 | CN104293833A | 申请公布日 | 2015-01-21 |
| 分类号 | C12N15/85(2006.01)I;C12N5/10(2006.01)I;C12N15/873(2010.01)I | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 张涌;吴海波;王勇胜;张艳;吕佳星 | 申请（专利权）人 | 杨凌科元克隆股份有限公司 |
| 代理机构 | 陕西增瑞律师事务所 | 代理人 | 孙卫增 |
| 地址 | 712100 陕西省西安市杨凌示范区邰城路3号 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明公开了一种基于TALEN介导的Sp110巨噬细胞特异打靶载体及重组细胞，对牛胎儿成纤维细胞进行基因打靶获得的M-S位点定点敲入Sp110基因的牛胎儿成纤维细胞。利用打靶载体中的MSR1启动子，使得定点敲入的Sp110在且仅在牛的外周血巨噬细胞中正常转录和表达。本发明利用电穿孔的方法将打靶载体和TALEN位点特异性核酸切割酶表达载体共转染牛胎儿成纤维细胞，通过PCR和Southern?Blotting筛选和验证获得了打靶的阳性克隆细胞。以该阳性克隆细胞为核供体移入牛去核卵母细胞，获得转基因克隆胚胎。将转基因克隆胚胎移植到发情的受体牛子宫中，最终生产成活的转基因克隆牛。 |
