一种通用型牛β-酪蛋白位点基因打靶载体及其制备方法
基本信息
| 申请号 | CN201310100213.7 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN103160534B | 公开（公告）日 | 2015-02-25 |
| 申请公布号 | CN103160534B | 申请公布日 | 2015-02-25 |
| 分类号 | C12N15/63(2006.01)I;C12N15/66(2006.01)I;C12N15/65(2006.01)I | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 张涌;刘旭;郭文江;华松 | 申请（专利权）人 | 杨凌科元克隆股份有限公司 |
| 代理机构 | 西安通大专利代理有限责任公司 | 代理人 | 汪人和 |
| 地址 | 712100 陕西省西安市杨凌区邰诚路3号 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明公开了一种通用型牛β-酪蛋白位点基因打靶载体及其构建方法。所构建的载体包括5’同源臂和3’同源臂，以牛β-酪蛋白位点第二内含子锌指核酸酶识别位点的上下游各延伸700～850bp的同源序列作为5’同源臂和3’同源臂。本发明通过锌指核酸酶在DNA的特定位点产生缺口，通过同源重组末端接合来实现基因敲除，从而大大提高了基因敲除的效率；然后利用同源重组的方法将目的基因整合到体细胞的靶位点上，在打靶载体筛选基因和标记基因的两端加上Loxp序列便于后续工作中去除筛选基因和标记基因，从而提高体细胞克隆的效率。 |
