一种基于TALEN介导的基因打靶敲除山羊BLG的载体及重组细胞

基本信息

申请号 CN201510131862.2 申请日 -
公开(公告)号 CN104726495B 公开(公告)日 2018-06-19
申请公布号 CN104726495B 申请公布日 2018-06-19
分类号 C12N15/85;C12N15/55;C12N15/12;C12N5/10;C12N15/873 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 张涌;靳亚平;崔趁趁;刘军;葛恒涛;宋玉洁 申请(专利权)人 杨凌科元克隆股份有限公司
代理机构 北京慕达星云知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 代理人 崔自京
地址 712100 陕西省西安市杨凌示范区邰城路3号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种基于TALEN介导的基因打靶敲除山羊BLG的载体及重组细胞。本发明根据山羊β‑乳球蛋白基因,设计并构建了针对其第一外显子的TALEN真核表达载体以及含有较短同源臂的BLG基因敲除载体,与以TALEN表达载体为模板体外转录的mRNAs共同转染山羊胎儿成纤维细胞,经药物筛选及鉴定后得到β‑乳球蛋白基因敲除细胞。本发明利用TALEN技术大大提高了基因打靶效率,同时较短同源臂的利用可以更方便高效的进行中靶细胞的筛选,mRNAs的利用则避免了TALEN表达载体在基因组中的随机整合。