肿瘤驱动基因突变和微卫星不稳定性联合检测的方法、试剂盒和引物

基本信息

申请号 CN201910256744.2 申请日 -
公开(公告)号 CN109825590A 公开(公告)日 2019-05-31
申请公布号 CN109825590A 申请公布日 2019-05-31
分类号 C12Q1/6886(2018.01)I; C12Q1/686(2018.01)I; C12N15/11(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 蔡微菁; 严令华 申请(专利权)人 常州桐树生物科技有限公司
代理机构 上海元好知识产权代理有限公司 代理人 常州桐树生物科技有限公司
地址 213149 江苏省常州市常州西太湖科技产业园长扬路9号B2栋2楼
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种肿瘤驱动基因突变和微卫星不稳定性联合检测的方法、试剂盒和引物,该方法包含:步骤1,设计扩增引物,对目的片段进行PCR扩增,获得含有单碱基突变检测位点的第一PCR产物及含有MSI检测位点的第二PCR产物;步骤2,对PCR产物进行纯化;步骤3,设计用于单碱基延伸反应的第一引物和第二引物;第一引物针对单碱基突变位点进行设计;第二引物3’端的若干个连续碱基与所述第二PCR产物3’端的碱基互补,并且对第二引物的3’端进行修饰,以阻止第二引物的延伸;步骤4,对第一引物及所述第二PCR产物进行单碱基延伸;步骤5,对单碱基延伸反应产物进行纯化;步骤6,对纯化后的单碱基延伸反应产物进行联合检测。