一种重组小鼠成熟PRTN3蛋白的纯化方法

基本信息

申请号 CN202110915458.X 申请日 -
公开(公告)号 CN113528494A 公开(公告)日 2021-10-22
申请公布号 CN113528494A 申请公布日 2021-10-22
分类号 C12N9/64;C12N15/70;C12N15/62;C07K19/00;C07K1/22 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 杜仁乐;刘艺;史毅;向荣;罗云萍 申请(专利权)人 河南省医药科学研究院
代理机构 郑州芝麻绘智知识产权代理事务所(普通合伙) 代理人 李玲玲
地址 450000 河南省郑州市二七区大学路40号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种重组小鼠成熟PRTN3蛋白的纯化方法,首先构建mPRTN3‑pET‑20b(+)质粒,再在mPRTN3‑pET‑20b(+)质粒的mPRTN3成熟肽段氨基端加入甲硫氨酸‑谷氨酸辅助性序列,在羧基端加入His‑tag标签,重新构建得到pro‑mPRTN3‑pET‑20b(+)重组质粒,然后向含有上述重组质粒的菌液中添加诱导剂诱导重组成熟pro‑mPRTN3蛋白表达,对重组成熟pro‑mPRTN3蛋白过镍柱纯化后,去除其中的辅助性序列,得到重组成熟mPRTN3蛋白,然后对重组成熟mPRTN3蛋白进行纯化。本发明得到的重组成熟mPRTN3蛋白,具有纯度高、活性好的特点。