体外检测MUSK-Ab和LRP4-Ab的方法及试剂盒

基本信息

申请号 CN201810989134.9 申请日 -
公开(公告)号 CN108931513B 公开(公告)日 2021-11-19
申请公布号 CN108931513B 申请公布日 2021-11-19
分类号 G01N21/64(2006.01)I;G01N33/68(2006.01)I 分类 测量;测试;
发明人 高峰;韩姣姣;李明强;张迎娜;张婧;赵雪;吕杰;方华 申请(专利权)人 河南省医药科学研究院
代理机构 无锡市汇诚永信专利代理事务所(普通合伙) 代理人 张欢勇
地址 450000河南省郑州市二七区大学路40号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明涉及一种体外检测MUSK‑Ab和LRP4‑Ab的方法及试剂盒。该方法包括以下步骤:取293T细胞,将293T细胞转染pCMV6‑AC‑GFP‑MuSK重组质粒和/或pCMV6‑AC‑GFP‑LRP4重组质粒;向转染pCMV6‑AC‑GFP‑MuSK重组质粒的转染细胞和/或转染pCMV6‑AC‑GFP‑LRP4重组质粒的转染细胞添加多聚甲醛后固定15~30min;磷酸盐缓冲液洗涤之后添加牛血清白蛋白和TritonX‑100进行封闭、通透2~3h;取待测血清,添加封闭、通透后的pCMV6‑AC‑GFP‑MuSK重组质粒的转染细胞和/或封闭、通透的pCMV6‑AC‑GFP‑LRP4重组质粒的转染细胞中,24~28℃下孵育45min~2h,磷酸盐缓冲液洗涤之后加入Alexa Fluor568标记的羊抗人IgG,24~28℃下孵育45min~2h,磷酸盐缓冲液洗涤后使用荧光显微镜的蓝色激发光和绿色激发光激发,观察并拍照记录。所使用试剂均为常规试剂,不需要依赖价格昂贵的试剂盒,检测成本较低。