一种谷氨酸脱羧酶重组菌及其构建方法和应用
基本信息
| 申请号 | CN201811652655.1 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN111378611B | 公开（公告）日 | 2022-02-22 |
| 申请公布号 | CN111378611B | 申请公布日 | 2022-02-22 |
| 分类号 | C12N1/21（2006.01）I;C12N15/70（2006.01）I;C12N15/60（2006.01）I;C12N9/88（2006.01）I;C12P13/00（2006.01）I;C12R1/19（2006.01）N;CN 101054569 A,2007.10.17;CN 105296523 A,2016.02.03;CN 101945997 A,2011.01.12;CN 103484419 A,2014.01.01;CN 101063144 A,2007.10.31;JP S504294 A,1975.01.17;WO 2011137369 A1,2011.11.03 靳春鹏等.谷氨酸脱羧酶基因工程改造研究进展.《食品与发酵工业》.2016,第42卷（第12期）,;田灵芝等.一株重组大肠杆菌/pET-28a-lpgad 的构建及其高效生产 γ-氨基丁酸转化条件的优化.《生物工程学报》.2012,第28卷（第1期）,;Jingwei Zhang et al..Metabolic engineering of Escherichia coli for the biosynthesis of 2-pyrrolidone.《Metabolic Engineering Communications》.2015,第3卷;Haina Yuan et al..Identification of new glutamate decarboxylases from Streptomyces for efficient production of γ-aminobutyric acid in engineered Escherichia coli.《Journal of Biological Engineering》.2019,第13卷 | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 占纪勋 | 申请（专利权）人 | 杭州唯铂莱生物科技有限公司 |
| 代理机构 | 杭州创智卓英知识产权代理事务所（普通合伙） | 代理人 | 郑思思 |
| 地址 | 310000浙江省杭州市余杭区良渚街道七贤桥村（1幢）3楼301 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明公开了一种谷氨酸脱羧酶重组菌，该重组菌为导入了谷氨酸脱羧酶基因的大肠杆菌，其中所述的谷氨酸脱羧酶基因为来源于弓形链霉菌NRRL 15443的StGAD、链霉菌MJ654‑NF4的SsGAD或嗜铬链霉菌ATCC 49982的ScGAD，其核苷酸序列如SEQ ID No：1‑3所示。本发明采用弓形链霉菌NRRL 15443、链霉菌MJ654‑NF4和嗜铬链霉菌ATCC 49982作为菌株，通过PCR扩增技术从上述三种菌株的基因组上扩增得到了谷氨酸脱羧酶的编码基因：SsGAD、StGAD、ScGAD，利用大肠杆菌E.coli BL21（DE3）作为宿主，成功构建了能够高效表达谷氨酸脱羧酶的重组菌，该工程菌经历至少10次的重复利用依然保持极高的转化效率。本发明还提供了上述重组菌的构建方法及该重组菌在制备GABA的应用，上述方法生产易操作，易放大，稳定性好，适于大规模工业化生产。 |
