人羊膜上皮干细胞库的构建方法

基本信息

申请号 CN201710085128.6 申请日 -
公开(公告)号 CN106801032B 公开(公告)日 2021-03-02
申请公布号 CN106801032B 申请公布日 2021-03-02
分类号 C12N5/0735(2010.01)I;G01N15/14(2006.01)I;G01N33/68(2006.01)I;C12N5/073(2010.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 庞希宁;施萍;赵峰;郎宏鑫 申请(专利权)人 沈阳艾米奥生物工程技术研发中心有限公司
代理机构 沈阳智龙专利事务所(普通合伙) 代理人 宋铁军
地址 110000辽宁省沈阳市浑南新区智慧二街400-4号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明涉及一种人羊膜上皮干细胞库的构建方法。其方法是取人羊膜,用胰蛋白酶消化后,过滤制成单细胞悬液;在DMEM/F12培养基中添加人表皮细胞生长因子、人转铁蛋白、人胰岛素、亚硒酸钠、丙氨酰‑L‑谷氨酰胺二肽、丙氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、脯氨酸和丝氨酸,使细胞在无血清条件下,置于37℃、饱和湿度、体积分数为5%的CO2培养箱中培养,换液和传代。将体外培养和扩增获得细胞置液氮冷冻保存,建立可供检索的细胞信息档案,即构建人羊膜上皮干细胞库。本发明储存人羊膜上皮干细胞,其具有来源广泛、不受伦理限制的特点,细胞培养和储存介质无动物源性。可提供上皮干细胞进行细胞治疗及其他应用。