一种在链霉菌中高效表达磷脂酶D的方法及重组链霉菌
基本信息
申请号 | CN202011640261.1 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN112575023A | 公开(公告)日 | 2021-03-30 |
申请公布号 | CN112575023A | 申请公布日 | 2021-03-30 |
分类号 | C12N9/16(2006.01)I;C12N15/76(2006.01)I;C12R1/465(2006.01)N;C12N1/21(2006.01)I;C12R1/48(2006.01)N | 分类 | 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程; |
发明人 | 朱海华;王鋆坦;王小瑞;平洋;谭静;张亚勋;周莉;王慧 | 申请(专利权)人 | 河南省商业科学研究所有限责任公司 |
代理机构 | 成都弘毅天承知识产权代理有限公司 | 代理人 | 李颖 |
地址 | 450000河南省郑州市金水区文化路87号 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明属于基因工程领域,涉及一种在链霉菌中高效表达磷脂酶D的方法,步骤一,选择磷脂酶D的异源高效表达宿主,步骤二,筛选磷脂酶D合成基因的最佳来源,步骤三,获取链霉菌来源的磷脂酶D基因片段,步骤四,连接目的基因形成磷脂酶D重组质粒,步骤五,重组质粒接合转移至宿主菌,步骤六,重组菌株的发酵培养及磷脂酶D酶活检测,进而得到高效表达磷脂酶D的重组链霉菌。选用链霉菌来源的磷脂酶D进行重组蛋白异源表达,具有天然优势,对磷脂酶D合成基因进行了密码子优化,选取变铅青链霉菌SBT5作为异源表达宿主,优异的异源表达效果加上良好的胞外活性分泌表达效果,使得该重组菌株具有极高的创新性和实用性。 |
