基因全片段快速测序方法
基本信息
| 申请号 | CN201410429092.5 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN104232761A | 公开（公告）日 | 2014-12-24 |
| 申请公布号 | CN104232761A | 申请公布日 | 2014-12-24 |
| 分类号 | C12Q1/68(2006.01)I | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 王凯;汪锋;赵倩;贾海英 | 申请（专利权）人 | 武汉希望云生物信息科技有限公司 |
| 代理机构 | 武汉河山金堂专利事务所 | 代理人 | 胡清堂 |
| 地址 | 430000 湖北省武汉市高新大道666号光谷生物城B5三楼C042 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明提供了基因全片段(>50kb)快速测序方法，该方法包括以下步骤：(1)采用PrimeSTAR?GXL?DNA酶，在相同PCR条件下扩增不同基因片段，所述PCR条件优选96℃～100℃变性5～15sec，66℃～70℃退火延伸6～10min，25～35个循环；(2)标准化PCR产物；(3)制备测序文库；(4)基因测序。使用本方法可在相同PCR条件下扩增不同长度基因片段和不同Tm值的引物，相同退火温度及延伸时间即可成功扩增出目的片段，结合MiSeq平台进行测序，为长链PCR与新一代基因测序技术的结合应用提供了一种24小时内生成结果的快速有效的方法。 |
