一种具有高特异性识别黄曲霉毒素B1的纳米抗体2018AFB-N11及其应用

基本信息

申请号 CN201910129322.9 申请日 -
公开(公告)号 CN109705215B 公开(公告)日 2019-05-03
申请公布号 CN109705215B 申请公布日 2019-05-03
分类号 C07K16/14(2006.01)I 分类 -
发明人 何婷;杨运煌;朱江;胡锐;聂瑶;李双利 申请(专利权)人 武汉中科兴达技术有限公司
代理机构 南京纵横知识产权代理有限公司 代理人 徐瑛
地址 430000湖北省武汉市武昌区八一路小洪山3号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种具有高特异性识别黄曲霉毒素B1的纳米抗体2018AFB‑N11及其应用。利用黄曲霉毒素B1完全抗原免疫羊驼,提取免疫后羊驼血液中的RNA,采用一步法RT‑PCR系统扩增出羊驼重链抗体可变区VHH基因,与pComb3X载体连接后转化大肠杆菌得到高质量的纳米抗体基因库,将黄曲霉毒素B1完全抗原包被在酶标板上,筛选噬菌体展示纳米抗体基因库,获得特异性识别黄曲霉毒素B1的纳米抗体基因,再将此基因转化至大肠杆菌中,建立能在大肠杆菌中高效表达的纳米抗体菌株。本发明公开的黄曲霉毒素B1纳米抗体2018AFB‑N11灵敏度高、特异性好,对黄曲霉毒素B1的50%抑制浓度IC50为1.26ng/mL;与黄曲霉毒素B2、G1、G2、M1的交叉反应率均小于0.1%。其可用于高特异性识别黄曲霉毒素B1的检测试剂的研发。