一种具有高特异性识别黄曲霉毒素B1的纳米抗体2018AFB-N11及其应用
基本信息
申请号 | CN201910129322.9 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN109705215B | 公开(公告)日 | 2019-05-03 |
申请公布号 | CN109705215B | 申请公布日 | 2019-05-03 |
分类号 | C07K16/14(2006.01)I | 分类 | - |
发明人 | 何婷;杨运煌;朱江;胡锐;聂瑶;李双利 | 申请(专利权)人 | 武汉中科兴达技术有限公司 |
代理机构 | 南京纵横知识产权代理有限公司 | 代理人 | 徐瑛 |
地址 | 430000湖北省武汉市武昌区八一路小洪山3号 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明公开了一种具有高特异性识别黄曲霉毒素B1的纳米抗体2018AFB‑N11及其应用。利用黄曲霉毒素B1完全抗原免疫羊驼,提取免疫后羊驼血液中的RNA,采用一步法RT‑PCR系统扩增出羊驼重链抗体可变区VHH基因,与pComb3X载体连接后转化大肠杆菌得到高质量的纳米抗体基因库,将黄曲霉毒素B1完全抗原包被在酶标板上,筛选噬菌体展示纳米抗体基因库,获得特异性识别黄曲霉毒素B1的纳米抗体基因,再将此基因转化至大肠杆菌中,建立能在大肠杆菌中高效表达的纳米抗体菌株。本发明公开的黄曲霉毒素B1纳米抗体2018AFB‑N11灵敏度高、特异性好,对黄曲霉毒素B1的50%抑制浓度IC50为1.26ng/mL;与黄曲霉毒素B2、G1、G2、M1的交叉反应率均小于0.1%。其可用于高特异性识别黄曲霉毒素B1的检测试剂的研发。 |
