重组质粒及其制备方法和利用其制备的能表达耐高温α-淀粉酶的细胞的制备方法及应用

基本信息

申请号 CN201910126303.0 申请日 -
公开(公告)号 CN109837294A 公开(公告)日 2019-06-04
申请公布号 CN109837294A 申请公布日 2019-06-04
分类号 C12N15/75;C12N15/66;C12N1/21;C12N9/28;C12R1/125 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 周辉 申请(专利权)人 广州睿辰生物科技有限公司
代理机构 芜湖安汇知识产权代理有限公司 代理人 尹婷婷
地址 510000 广东省广州市广州高新技术产业开发区科学城开源大道11号B10栋3层306房
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种重组质粒及其制备方法和利用其制备的能表达耐高温α‑淀粉酶的细胞的制备方法及应用。首先制备含有P43启动子和lacO与lacI基因的重组质粒;再将耐高温α‑淀粉酶基因连接至重组质粒当中,质粒中含有枯草芽孢杆菌强启动子P43,大大提高了耐高温α‑淀粉酶的产量,同时质粒中含有的lacO与lacI基因序列,可以使用IPTG进行诱导表达,相比于微生物诱变育种更加的快捷和目的性;然后将受体细胞和和含有耐高温α‑淀粉酶基因的载体通过电击转化之后即可得到得到能表达耐高温α‑淀粉酶的细胞。当使用枯草芽孢杆菌为受体细胞时,其基因信息明确,生产速度快,培养密度大,可提耐高温α‑淀粉酶的产量和酶活力。