微球标记抗体的方法
基本信息
申请号 | CN202111164677.5 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN113917133A | 公开(公告)日 | 2022-01-11 |
申请公布号 | CN113917133A | 申请公布日 | 2022-01-11 |
分类号 | G01N33/532(2006.01)I | 分类 | 测量;测试; |
发明人 | 宋路红 | 申请(专利权)人 | 杭州联科生物技术股份有限公司 |
代理机构 | 北京知果之信知识产权代理有限公司 | 代理人 | 高科;李志刚 |
地址 | 310000浙江省杭州市萧山区闻堰街道天马路1688号2幢3层 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明公开了微球标记抗体的方法。本发明中,使用涡旋混合仪将微球充分振荡分散后,用流式进行微球计数。取适量微球,用加入50mM MES(pH5pH6.0)重悬洗涤,再重悬于含5mg/ml EDC、5mg/ml NHS的50mM MES(pH6.0)溶液沉淀,使用涡旋振荡机对其进行涡旋振荡处理,之后使用超声震荡机对其进行超声震荡处理结束之后,将微球溶液加入到离心机的内部,对其进行离心处理,离心过程结束之后,取出离心液中的上清液,将其废弃不用;之后使用清水再对溶液重复洗涤一次备用进行活化;用100mM MES(pH6.0)溶液洗涤后,加入100mM MES(pH6.0)溶液和适量捕获抗体,使抗体与微球进行偶联;加入250~~300μl封闭液重悬进行封闭,封闭液为99.88%PBS溶液、含0.1%BSA溶液和0.02%Tween20的PBS溶液,从而使微球表面空余的位点被BSA填满,检测抗体不会被非特异性的吸附到微球上,而只会跟特异性的目的蛋白结合,从而提高了检测的准确性。 |
