微球标记抗体的方法

基本信息

申请号 CN202111164677.5 申请日 -
公开(公告)号 CN113917133A 公开(公告)日 2022-01-11
申请公布号 CN113917133A 申请公布日 2022-01-11
分类号 G01N33/532(2006.01)I 分类 测量;测试;
发明人 宋路红 申请(专利权)人 杭州联科生物技术股份有限公司
代理机构 北京知果之信知识产权代理有限公司 代理人 高科;李志刚
地址 310000浙江省杭州市萧山区闻堰街道天马路1688号2幢3层
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了微球标记抗体的方法。本发明中,使用涡旋混合仪将微球充分振荡分散后,用流式进行微球计数。取适量微球,用加入50mM MES(pH5pH6.0)重悬洗涤,再重悬于含5mg/ml EDC、5mg/ml NHS的50mM MES(pH6.0)溶液沉淀,使用涡旋振荡机对其进行涡旋振荡处理,之后使用超声震荡机对其进行超声震荡处理结束之后,将微球溶液加入到离心机的内部,对其进行离心处理,离心过程结束之后,取出离心液中的上清液,将其废弃不用;之后使用清水再对溶液重复洗涤一次备用进行活化;用100mM MES(pH6.0)溶液洗涤后,加入100mM MES(pH6.0)溶液和适量捕获抗体,使抗体与微球进行偶联;加入250~~300μl封闭液重悬进行封闭,封闭液为99.88%PBS溶液、含0.1%BSA溶液和0.02%Tween20的PBS溶液,从而使微球表面空余的位点被BSA填满,检测抗体不会被非特异性的吸附到微球上,而只会跟特异性的目的蛋白结合,从而提高了检测的准确性。