人胚肾293细胞亚克隆细胞株专利查询专利号|摘要-满商公司网

人胚肾293细胞亚克隆细胞株

基本信息

申请号	CN03126889.7	申请日	-
公开（公告）号	CN100427590C	公开（公告）日	2008-10-22
申请公布号	CN100427590C	申请公布日	2008-10-22
分类号	C12N5/10(2006.01);C12N15/11(2006.01);C12N15/53(2006.01);C12N9/02(2006.01)	分类	生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程;
发明人	张晓志;彭朝晖	申请（专利权）人	深圳市赛百诺基因技术有限公司
代理机构	北京纪凯知识产权代理有限公司	代理人	张晓志;彭朝晖;深圳市赛百诺基因技术有限公司
地址	518057广东省深圳市高新技术产业园（北区）郎山路赛百诺公司
法律状态	-

摘要

一种用于生产重组腺病毒制品的人胚肾293细胞亚克隆细胞株，该细胞株是由ATCC 293细胞经亚克隆方法制得，它含有人三磷酸甘油醛脱氢(human glyceraldehydes-3-phosphate dehydrogenase，GAPD)，该细胞株由下列方法培养制得：a、将ATCC293细胞(P32)复苏后进行细胞扩增传代至第33代次(P33)，然后将P33细胞悬液用FACS流式细胞仪进行亚克隆；b、用2个96孔板，每孔中0.2ml培养基中放置一个细胞，在36～38℃、3～6％CO₂条件下培养6～10天；c、挑选出细胞形态均一、生长良好的、已达到不低于60％铺满生长的克隆；d、重复上述步骤四次，最后挑选出1个亚克隆的细胞柱(P37)，继续培养扩增并制成原代细胞库(P38)，置于-80℃冻存；e、以原代细胞库(P38)为基础制备主代细胞库及工作细胞库。本发明应用基因工程技术和分子克隆技术，使其具有明显增强细胞的贴壁生长的功能和细胞生长倍增时间短的优点。